悬尾实验

悬尾实验（Tail suspension test, TST）是一种经典而又能快速评价抗抑郁药物、兴奋药物、镇静药物药效的方法。其原理是利用小鼠悬尾后企图逃脱但又无法逃脱，从而放弃挣扎，进入特有的抑郁不动状态，实验过程中记录动物不动时间来反映抑郁状态，抗抑郁药物、兴奋药物能明显地缩短改变其状态。

实验步骤：

1、实验开始之前，先确认实验箱是清洁，无味道的，尤其要注意清理实验箱底部上一次实验测试动物遗留下来的粪便、尿液等。

2、实验人员在软件中设置好相应的参数，记录好动物的编号、日期、状态等信息；

3、将实验动物从饲养笼中轻轻取出，剪出长 17cm 绝缘胶带（宽 1～1.5cm），从一端 2cm 处做标记。这个 2cm 的部分用于将胶带连接到尾部，而剩余的 15cm 用于悬挂小鼠； 胶带应贴在尾部的尾端，尾部留 2-3mm 的距离；

4、将胶带贴在悬挂杆上，使小鼠腹部面向摄像头（便于捕捉四肢的运动情况），并立 即离开；

5、同时打开动物行为学分析软件，自动记录动物在空中的活动，实验时间通常为6分钟；

6、实验结束后，应轻轻将胶带从尾巴上拉下来，将实验动物放入事先准备好的其他饲 养笼内。

图1 悬尾实验装置示意图

结果分析：

记录前 2min 内第一次出现不动的时间和后 4min 内累计不动的时间。 前 2min 内出现不动时间越早，说明动物越容易诱导出抑郁；后 4min 内不动时间越长， 说明动物抑郁倾向。

注意事项：

1、不建议用较重的大鼠，因为大鼠只能通过它们的尾巴来支持它们的体重，这对大鼠来说是痛苦的。同样的道理，应该注意避免使用异常重的小鼠（例如用于模拟肥胖的小鼠）， 在这种情况下，实验者应该寻找替代性的测试，例如强迫游泳实验。

 2、悬挂用的胶带应牢固地粘贴在小鼠尾部和悬挂杆上，并且足够坚固以承受正在测试的小鼠的重量。但是，胶带不应该过于粘滞。

3、尾巴攀爬阻止器，小鼠在实验过程，会出现追求和攀爬它们自己的尾巴的现象，这 是个普遍的问题。解决方法很简单，而且非常有效：将一段塑料管切成 4 cm 长中空圆柱体 （内径 1.3 cm 左右，1.5 g）放置在小鼠尾巴周围就能防止这种尾巴爬行行为。注意的是， 在没有使用阻止器之前，已经成功爬上尾巴的小鼠知道逃生是可能的。因此应将这类小鼠排 除。

4、使用软件分析时，选择最佳对比度的背景：白鼠使用黑色背景，黑鼠使用白色背景

5、动物悬挂在隔间中间，宽度和深度足够大，不能与墙壁接触。

 6、实验环境要求安静，保证隔音，环境噪声控制在 60dB 以下。

7、实验环境需要弱光照明，照明度控制在 100Lux 以下。

8、实验开始前，将动物放在实验室 0.5～3h，降低动物对新环境的不安情绪。

9、实验前需要操作者对实验动物每天抚摸 1～2min 以减少非特异性应激刺激对实验动物检测中的影响。

 10、实验动物的性别、周龄尽量保持一致，因为激素水平可能会影响动物行为。

11、注意实验动物的昼夜节律，尽量选择同一时间段开展实验，一般为每天正常光周期 的开灯后 1 小时开始检测。

12、数据分析可以通过软件来进行，如果没有条件，也可以通过人工计时的方法。小鼠6分钟的实验数据，只分析后面4分钟的测试数据。