Genelight 核酸染料     

概述

    Genelight是本公司开发的新型聚次甲基类核酸染料，与市场上最好的核酸染料gelgreen类似，具有安全、高灵敏度、高稳定性等突出特点，可以作为各种核酸电泳的染色剂，可完美替代EB及SYBR 系列核酸染料以及高毒性的吖啶橙染料。Genelight最大吸收峰为500nm左右，另外，在紫外

区200nm—300nm还有一个吸收峰。兼容254 nm的紫外透射或可见光激发的凝胶成像仪，如Dark Reader或488 nm凝胶激光扫描仪。

特点
      安全、低毒：Genelight由于独特的相对疏水性和大分子量，不能轻易穿透人体细胞膜，引发致癌，艾姆斯氏试验结果也表明，该类染料的诱变

性远远小于EB。请注意，所有核酸染料均不能保证完全无毒，相对的安全性来自于染料能否轻易的进入细胞。Genelight的安全性来自于其分子量较大和相对疏水性，不能轻易进入细胞，以及染料与核酸通过静电方式结合而不是嵌入DNA，所以不易引起突变。

灵敏度高：核酸检测的灵敏度平均高于EB染色法10倍左右。适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。

      请注意：市面上存在着多种gelgreen类似的产品，质量不尽相同，主要区别在于最终的结构是否合适以及浓度和纯度是否足够。超纯的Genelight保证了DNA 条带清晰且灵敏度高（见下图）。条带清晰的DNA带便于检测或者分离和回收DNA片段。

图1. 1%的Agarose gel。Lane 1、3、5: DL2000 DNA marker; lane2、4、6：λ-EcoT14Ⅰdigest DNA marker。

图中明显看出Genelight跑出的片段条带清晰且窄

      稳定性高：使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶时，不影响染料的稳定性；室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定，耐光性强。

由于Genelight具有良好的热稳定性，可以在热的琼脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷却。摇晃，振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将Genelight储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中，然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。Genelight兼容所有常用的电泳缓冲溶液。

      信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。不像某些剧毒的冒牌产品有明显的背景信号，如EB或者吖啶橙（荧光信号低且有剧毒）。

图2. 1%的Agarose gel。Lane 1、3: DL2000 DNA marker; lane2、4：λ-EcoT14ⅠdigestDNA marker。
图中可以看出假冒产品明显背景极高，极有可能为EB

      操作简单：具有多种使用方法。与EB一样，在预制胶和电泳过程中染料不降解，可直接电泳时染色；若电泳后染色，也只需30分钟且无需脱色或冲洗
      适用范围广：可适用于多种电泳分析。可选择电泳前染色（胶染法）或电泳后染色（泡染法）；适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可用于dsDNA、ssDNA或 RNA 染色。
      兼容性高：与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容。适用于使用 254nm 激发的紫外凝胶成像系统或蓝色可见光激发的凝胶观察装置。推荐使用蓝色可见光激发的凝胶观察装置，效果最佳。
价格经济：价格远低于进口同类产品。

使用方法
      方法一：直接电泳染色法
      1. 制胶: 按常规操作，制备琼脂糖凝胶，凝胶熔化后，加入10000×Genelight染料，使染料在凝胶中的终浓度为1×，（例如制备50ml凝胶，加入染料5ul）。轻轻摇匀，倒胶。
      2. 电泳、观测：按常规方法电泳，观测。
     提示：对于1KB以上的Marker建议20000×Genelight减少一半用量。如果条带有拖尾现象，也请减半用量。

     方法二：电泳后染方法：本方法适合于各种凝胶分析。
      1. 按照常规方法进行电泳。
      2. 用PH 7.0 — 8.5 的缓冲液（如：TAE，TBE 或 TE），按照30000：1的比例进行Genelight染料的稀释，混匀，制成染色溶液，。
      3. 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器避光。室温振荡染色10—45分钟。染色时间因凝胶浓度和厚度而定。凝胶越厚、浓度越高，所需染色时间越长。对于聚丙烯酰胺凝胶，可以直接在玻璃平皿上染色（玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理，避免染料吸附在玻璃表面上），将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上，均匀地覆盖整个胶板，并染色10—30分钟。
      4. 观测。

质保声明
       Genelight核酸染料经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的安全、纯度与稳定性。请使用前务必仔细阅读本手册。

注意事项及其他特点
      1. 加入Genelight的凝胶可反复熔化使用，但检测灵敏度会降低。
      2. Genelight对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议使用聚丙烯类容器进行稀释、贮存、染色等操作。
      3. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中，Genelight可以全部从双链核酸上去掉。
      4. 具有兼容性：对分子生物学中常用的酶（如：Taq酶、内切酶、T4连接酶等）没有抑制作用。

使用限制：

       本试剂仅限用于科学研究。

储存与安全：

       本品常温运输，储存于室温，避光，有效期至少一年。